Гуманизированные трансгенные мыши-биомодели для фармакологических и токсикологических исследований

  • Владимир Павлович Рябых ВНИИФБиП, Боровск, Россия
  • В. А. Езерский ВНИИФБиП, Боровск, Россия
  • Е. М. Колоскова ВНИИФБиП, Боровск, Россия
  • С. В. Максименко ВНИИФБиП, Боровск, Россия
  • О. Б. Жукова ВНИИФБиП, Боровск, Россия
  • Т. П. Трубицына ВНИИФБиП, Боровск, Россия

Аннотация

Цель: персонализированная медицина  предполагает лечение заболевания с учетом генотипа  пациента и индивидуальных особенностей  экспрессии генов. Информация  о генетических особенностях пациента позволит точнее подбирать препарат и дозу для  достижения наилучшего эффекта при лечений болезней. Гуманизированные мыши, содержащие функционирующие гены человека, являются незаменимой моделью для этих целей.  Нашей задачей было получение линий трансгенных мышей с интегрированными генами N-ацетилтрансферазы (NAT1 и NAT2) человека, способными передавать ген по наследству, для их использования в качестве биомоделей в фармакологии, токсикологии, а также фундаментальных и прикладных биомедицинских исследованиях [1]. Материалы и методы: работы проводились в лаборатории клеточной и генной инженерии ВНИИФФиП животных. Генно-инженерные конструкции включали в себя промоторно-энхансерную область гена альбумина мыши,  нуклеотидные последовательности генов NAT1 или NAT2 человека и SV40 сигнал полиаденилирования.  Генетически модифицированные мыши были получены методом микроинъекции линейной генно-инженерной конструкции в мужской пронуклеус зигот. Микроинъецированные культивированные зиготы, достигшие стадии двух бластомер трансплантировали самкам-реципиентам, которых для индукции псевдобеременности предварительно подсаживали через перегородку к вазэктомированным самцам для синхронизации половых циклов [2].   Результаты: традиционным методом микроинъецирования зигот, как правило, со случайным встраиванием линейной конструкции, нами были получены 5 NAT1 и 3 NAT2 трансгенных мышей, потенциальных основателей линий. В результате к началу 2016 г. были получены устойчивые популяции животных с генами человека NAT1 и  NAT2 в 6-м поколении [3]  со стабильной экспрессией  N-ацетилтрансфераз человека.  Мыши обеих линий оптимальны для доклинических испытаний лекарственных средств.Заключение: Особенности и механизмы Nat-ацетилирования  до сих пор были изучены  относительно слабо, что  связано с отсутствием соответствующих биологических моделей.  В настоящее время большая часть исследований по изучению воздействия различных веществ  на человека (в том числе  и лекарственных) проводится на животных.  Необходимо получать трансгенных животных с человеческими генами для создания прогнозируемых моделей  изучения ферментов биотрансформации ксенобиотиков. Трансгенные мыши с интегрированными генами N-ацетилтрансферазы (Nat1 и Nat2) человека, как биомодели, имеют огромную востребованность при испытании фармакологической эффективности и токсичности новых лекарственных средств.

Литература

1. Рябых В.П., Колоскова Е.М., Езерский В.А., Трубицина Т.П., Максименко С.В. Проблемы биологии продуктивных животных. Боровск. 2015. Т. 2. С. 5-22.
2. Рябых В.П., Трубицина Т.П., Максименко С.В., Жукова О.Б., Столярова В.Н., Езерский В.А., Колоскова Е.М. Проблемы биологии продуктивных животных. 2016. №2. С.5-21.
3. В.Н. Каркищенко, Л.А. Болотских, Г.Д. Капанадзе, Н.Н. Каркищенко, Е.М. Колоскова, С.В. Максименко, Е.Л. Матвеенко, Н.В. Петрова, В.П. Рябых, А.О. Ревякин, Н.В. Станкова, Х.Х. Семёнов. Биомедицина. 2016. №. С.74-85.
Опубликован
2018-01-02
Раздел
Материалы конференций